【碩士】聚氨酯固定化糞鏈球菌制備L-瓜氨酸的研究

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　　【碩士】聚氨酯固定化糞鏈球菌制備L-瓜氨酸的研究　　授予學(xué)位：碩士　　學(xué)位授予單位：北京化工大學(xué)　　學(xué)位年度：2011　　瓜氨酸作為-種非蛋白質(zhì)氨基酸，在尿素循環(huán)中起著重要的作用。本文建立了使用聚氨酯固定化糞鏈球菌制備L-瓜氨酸的方法，并研究了反復(fù)批次發(fā)酵以及填充床中連續(xù)轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-瓜氨酸的生產(chǎn)工藝，最后使用光譜法研究了L-瓜氨酸與牛血清白蛋白的相互作用。建立了-套成本低，產(chǎn)量高，生產(chǎn)簡便，產(chǎn)品質(zhì)量高的路線，為今后工業(yè)化生產(chǎn)L-瓜氨酸奠定了基礎(chǔ)?！　? 本文首先考察了使用聚氨醋固定化糞鏈球菌(Streptococcus faecalisBT001)的可行性。實(shí)驗(yàn)表明，經(jīng)過多次洗滌后，固定化菌體量可達(dá)0.632g}g，效果良好，確定糞鏈球菌與聚氨酯載體有較好的生物相容性。　　進(jìn)-步設(shè)計(jì)了一系列實(shí)驗(yàn)對固定化的影響因子進(jìn)行了考察，當(dāng)聚氨酯添加量為1.0g，尺寸為5*5*5mm，培養(yǎng)基pH值為7.0，搖床溫度為35 C ,轉(zhuǎn)速為150rmizi，經(jīng)過52h達(dá)到最大吸附量。同時(shí)確定了在搖床中固定化細(xì)胞轉(zhuǎn)化制備L-瓜氨酸的最適條件:搖瓶裝液量為5OmL/250mL，加入0.6g固定化細(xì)胞，底物100g}L-的L-精氨酸，表面活性劑CTAB 0.3g.L-,起始pH為7.0，搖床轉(zhuǎn)速為100r.miri,溫度為35 0C的條件下轉(zhuǎn)化36h,L-瓜氨酸產(chǎn)量最大可達(dá)到53g.L。得到的固定化細(xì)胞可重復(fù)使用5個(gè)批次，大大縮短了轉(zhuǎn)化時(shí)間?！　? 本實(shí)驗(yàn)還考察了固定化細(xì)胞在填充床反應(yīng)器中制備L-瓜氨酸的工藝過程。在規(guī)格為，40X300反應(yīng)柱中裝有固定化細(xì)胞26g，反應(yīng)液含100g.L的L-精氨酸，0.3mo1.L，的醋酸緩沖液，0.3g.L的表面活性劑CTAB，調(diào)節(jié)pH值為7.0，設(shè)定流速為40mL.h，恒溫水槽35℃的條件下，固定化細(xì)胞在填充床反應(yīng)器中可連續(xù)使用巧次，L-瓜氨酸的產(chǎn)量基本維持在65g.L左右。　　最后，本文采用熒光碎滅法以及紫外吸收差譜法研究了L-瓜氨酸與牛血清白蛋白在不同pH值下的相互作用機(jī)制，并利Stern-Volmer方程求解出各種參數(shù)?！　?

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